PCR管发展
1985年,美国Perkin-Elmer Cetus公司发明了具有划时代意义的聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。PCR技术类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性—退火—延伸三个基本反应步骤构成。这个反应过程在PCR反应容器中进行。
随着基因扩增仪的不断发展,其反应容器也经历了从1.5ml到0.2ml(0.25ml)的离心管逐步发展成PCR专用的薄壁的0.2ml,0.1ml的pcr管。随着pcr扩增反应数量的提高,逐步形成了PCR条、PCR板高通量的基因扩增容器。
PCR仪(基因扩增仪)其发展主要分为以下几个阶段。1、手动/机械手式水浴基因扩增仪;2、全自动风冷或半导冷的定性基因扩增仪;3、终点法半定量PCR仪;4、实时荧光定量PCR仪。
1、手动/机械手式水浴基因扩增仪时期,主要用1.5ml的离心管作为反应体系,此时的pcr试剂(反应体系)有50-100ul,且需要加封石蜡油防止反应体系挥发。且反应管在水浴中需要一定的高度。
2、全自动风冷或半导冷的定性基因扩增仪;在这个仪器时代,仪器相对较小,0.2ml的离心管被广泛i应用,由于仪器为半导冷或风冷,所以需要温度的传递效率高,因此,专用的薄壁的0.2ml的pcr管应运而生。如果此时的仪器没有热盖装置,则然需要加液体石蜡覆盖反应体系。
3、终点法半定量PCR仪器应用时代,因为需要通过光度计检测反应结果,因此对PCR管的薄壁要求和光线通透性要求更高,pcr管的薄壁性是必要的条件。此时的pcr管主要是0.2ml的薄壁管。
4、实时荧光定量PCR仪仪器时代,此时普通PCR仪,梯度PCR仪,荧光定量PCR都有了热盖装置,PCR反应体系的效率也更高,反映体系基本在30ul以下,此时0.2mlPCR管和0.1mlPCR管被广泛应用,有的仪器采用毛细管作为PCR反应容器。
随着PCR技术的广泛应用,96孔或者384孔的PCR反应板是多个微量PCR管的集成,是专门为批量反应设计的。可拆的PCR板是由PCR条组成。
综上所述:离心管按照其容量分好多种,常用的有1.5ml,2ml,5ml,15或者50ml,较小的1.5ml和2ml(250ul)在PCR技术应用早期作为PCR管使用。随着PCR技术的发展,微量离心管逐步被专用的薄壁、透明的0.2ml的专用PCR管替代,并逐步发展成0.2mlPCR管和0.1mlPCR管以及多孔的PCR板。
早期PCR时,据说鼓盖设计能更好的防蒸发。
但后来热盖PCR仪出现,往往是适用平盖PCR管的,鼓盖的就不便于用热盖。这个主要看PCR仪。现在的PCR仪都有热盖,但分为平、鼓两种,分别对应两种PCR管。如果在平盖PCR仪式用鼓盖管子,会被压扁;在鼓盖PCR仪使用平盖管子倒是可以。建议还是配套使用较好。
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